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什么是PCR?PCR技术平台通常可分为qPCR和ddPCR

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发表于 2019-6-15 21:11:49 | 只看该作者 回帖奖励 |倒序浏览 |阅读模式
从各类技术类别来看,PCR技术由于壁垒相对较低,国产化程度高,国内企业布局相对较早,因此基于PCR技术的分子诊断产品占总产品量的70%以上。

PCR技术是一种用于扩增特定DNA片段的分子生物学技术,基本原理是在反应室中模拟细胞内的DNA复制,即人为创造核酸半保留复制条件,使目的DNA在细胞外完成扩增的过程。通过PCR技术进行分子诊断的流程如下:核酸提取——核酸扩增——核酸检测。

按照靶标数量划分,PCR技术平台通常可分为qPCR和ddPCR。

实时荧光定量PCR(qPCR)

Real-time PCR,美国PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出来的一种新的核酸定量技术,该技术是在常规PCR基础上加入荧光标记探针来实现其定量功能的,与普通PCR相比,实时定量PCR具有许多优点:利用荧光信号的变化实时检测PCR扩增反应中每一个循环扩增产物量的变化,最终对起始模板的定量分析。

ddPCR(数字PCR)

ddPCR系统利用油包水技术,在传统的PCR扩增前将一个大的反应体系进行微滴化处理,将此反应体系分割为成千上万个微滴,即成千上万个独立的PCR反应体系。在此过程中,样品被稀释至单分子水平,并被平均分配到这几万个反应体系中,每个微滴中不含或者含有至少一个待检测的核酸靶分子,这样也相当于变相的对靶365bet投注网址_365bet手机_365bet在线体育投注网进行富集。

目前,国内市场已现10余家数字PCR仪厂商,其中领航365bet投注网址_365bet手机_365bet在线体育投注网自主研发的数字PCR系统已获NMPA认证,锐讯生物、新羿生物、STILLA、伯乐还在申报中。

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